تعیین توالی و بررسی خصوصیات مولکولی ژن بتا ۱ و ۴ اندوگلوکاناز سویه bacillus subtilis b۵d

این پژوهش به منظور تعیین برخی ویژگی های کاتالیتیکی و خصوصیات مولکولی ژن کدکننده آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در سویهbacillus subtilis b5d  انجام شد. ژن کدکننده این آنزیم در سویه  b5d توسط آغازگرهای اختصاصی تکثیر، تعیین توالی و در پایگاه اطلاعاتی ncbi ثبت شد. تجزیه توالی حاصله و رسم درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار vector nti و mega.4 انجام شد. براساس نتایج حاصله قطعه تعیین توالی­شده شامل 794 نوکلئوتید بود که یک رشته پپتیدی با 264 اسیدآمینه را کد می کند. تجزیه توالی آمینواسیدی این ژن در سویه مورد بررسی نشان­داد که آنزیم اندوبتاگلوکاناز تولید­شده توسط سویه مورد پژوهش چندبخشی بوده که قسمت باند شونده به سلولز (cellulose binding domain, cbd) آن مربوط به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 3 و قسمت کاتالیک (cd) آنزیم مورد بررسی متعلق به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 5 است. همچنین فعالیت آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز تولید شده توسط سویه b5d، در محدوده دمایی 70-30 درجه سانتی گراد و ph 6/4 مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که بیشترین فعالیت کاتالیتیک آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در دمای 55 درجه سانتی گراد بوده که u/l 83/461 برآورد شد. بررسی پایداری آنزیم در شرایط دمایی و ph های مختلف نشان داد که تا دمای 60 درجه سانتی گراد و در محدوده ph 10-5 آنزیم پایداری بهتری دارد